Infecções intrarradiculares persistentes constituem as principais causas de insucesso do tratamento endodôntico e ainda são um desafio aos profissionais que se propõem a compreender os possíveis fatores e mecanismos que levam a essas falhas. Diante do exposto, o objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antimicrobiana do ácido peracético a 1% em um modelo de biofilme duas-espécies (Enterococcus faecalis e Candida albicans). A metodologia foi subdividida em 2 etapas: análise da atividade antimicrobiana do ácido peracético a 1% em um biofilme duas-espécies de diferentes maturações (7 e 28 dias) e ação da solução irrigadora em canais radiculares bovinos infectados experimentalmente. Os espécimes contaminados de forma padronizada com as duas espécies foram divididos aleatoriamente em 3 grupos: controle (sem tratamento), hipoclorito de sódio a 2,5% e ácido peracético a 1%. Para a primeira etapa, foram preparados blocos de dentina bovina com 5mm de diâmetro e 1mm de espessura (n = 7) sobre os quais houve o crescimento do biofilme misto em duas maturações distintas: 7 e 28 dias. Para a segunda etapa, a coroa dos dentes bovinos foi seccionada (n = 10) e o comprimento da raiz padronizado em 12mm, com instrumentação do canal até o equivalente a lima K #120. Foi iniciado um protocolo de contaminação intratubular seguido pela irrigação com as soluções descritas acima. Os espécimes receberam os corantes Live/Dead e Calcofluor White para avaliar a viabilidade microbiana e a matriz do biofilme obtendo-se imagens de fluorescência com Microscopia Confocal de Varredura a Laser. A distribuição de dados foi avaliada pelo teste de Shapiro-Wilk e os testes de Kruskal-Wallis e Dunn foram usados para as análises estatísticas (? = 0.05). Na eliminação dos biofilmes sobre os blocos, em ambas maturações, os biofilmes tiveram redução em sua viabilidade microbiana e matriz extracelular após o uso das soluções irrigadoras (p < 0.05). Apesar disso, biofilmes de 7 dias foram mais facilmente removidos do que os de 28 dias. Ambas soluções também foram efetivas e equivalentes estatisticamente, avaliando células e matriz. Em relação ao protocolo intratubular de contaminação, a viabilidade microbiana foi significativamente reduzida (p < 0.05) tanto no terço cervical quanto no médio após a aplicação dinâmica das soluções irrigadoras com uma taxa de fluxo pré-determinada. Também houve redução na matriz extracelular dos biofilmes (p < 0.05). Não houve diferença estatística entre as soluções irrigadoras em relação à eficácia antimicrobiana na redução da viabilidade e da matriz extracelular dos biofilmes em ambos os terços cervical e médio (p > 0.05). Concluiu-se que ambas soluções de hipoclorito de sódio a 2,5% e de ácido peracético a 1% demonstraram percentual de redução de matriz extracelular e de viabilidade microbiana semelhantes em um modelo de biofilme duas-espécies. Ver menos